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GB/T 29661-2013 化妝品中尿素含量的測定 酶催化法

【范圍】
本標準規(guī)定了化妝品中尿素含量的測定方法一一酶催化法。
本標準適用于化妝品中尿素的定量測定，其定量下限為0.025%。

【原理】
樣品在偏酸性條件下，所含尿素被尿素酶分解為銨鹽，用酸滴定，由此計算尿素含量。


【試劑和材料】
除另有規(guī)定外，試劑均為分析純. 水為 GB/T 6682 規(guī)定的三級水。
尿素酶: 0.5g以下可將0.25g尿素于40°C~45°C在1h內(nèi)完全分解。按照產(chǎn)品說明保存。
0.1mol/L鹽酸: 配置方法按 GB/T 601。
0.1mol/L NaOH溶液:稱取0.40g NaOH固體，溶于100mL水中。
無水乙醇。
塑料薄膜。

【分析步驟】
試樣制備
水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于高腳燒杯中，加入50mL水，用塑料薄膜封口，超聲提取20min。
將高型燒杯放在磁力攪拌器上，邊攪拌邊滴加鹽酸中和至pH4.0(用pH計，不計量，若溶液呈pH<4.0，則需滴加NaOH溶液到pH>4.0，再用鹽酸中和至pH4.0)，加入0.2g粉碎較細的尿素酶立即用塑料薄膜封口，

置于50°C水浴中不時的搖晃，30min后取出冷卻至室溫，邊攪拌邊用0.1mol/L的鹽酸滴定至pH4.0，記錄消耗的0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積V1，同時做一空白試驗，記錄消耗的0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積V0。

膏霜類(W/O)、油溶性樣品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于15mL離心管中，加10mL無水乙醇，超聲提取20min。以不低于5000r/min離心15min，將上清液全部轉(zhuǎn)移至高型燒杯中，再加入40mL水，搖勻。
余下步驟與"水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品"相同。

唇膏類將品
稱取均勻樣品0.5g(精確至0.01g)于15mL離心管中，加10mL無水乙醇，在80°C水浴中加熱3min~5min使唇膏融化，渦旋1min，超聲提取20min。以不低于5000r/min離心15min，將上清液全部轉(zhuǎn)移至高型燒杯中，再加入40mL水，搖勻。
余下步驟與"水劑類、乳液類、膏霜類(O/W)樣品"相同。

平行試驗
按上述步驟，對同一樣品進行平行實驗測定。

【結(jié)果計算】
按式(1)計算尿素含量，以%表示:

式中:
60.06一一尿素的相對分子質(zhì)量；
V1一一樣品消耗0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積，單位為毫升(mL)；
V0一一空白試驗消耗0.1mol/L鹽酸標準溶液的體積，單位為毫升(mL)；
c 一一0.1mol/L鹽酸標準溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
m 一一試驗樣品質(zhì)量，單位為克(g)。
計算結(jié)果保留至小數(shù)點后1位。
注: 若檢測尿素含量超過20%，需要以減少樣品稱樣量的方式重新醇進行測定。

【實驗儀器制備，推薦使用】化妝品中尿素含量的測定

京都電子KEM 電位滴定法自動電位滴定儀 AT-710S

產(chǎn)品操作演示：