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GB 5009.228-2016 食品安全國家標準 食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定

范圍
本標準規(guī)定了食品中揮發(fā)性鹽基氮的測定方法。
本標準適用于以肉類為主要原料的食品、動物的鮮(凍)肉、肉制品和調(diào)理肉制品、動物性水產(chǎn)品和海產(chǎn)品及其調(diào)理制品、皮蛋(松花蛋)和咸蛋等腌制蛋制品中揮發(fā)性鹽基氮的測定。

第一法  半微量定氮法
原理
揮發(fā)性鹽基氮是動物性食品由于酶和細菌的作用，在腐敗過程中，使蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)。揮發(fā)性鹽基氮具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出，利用硼酸溶液吸收后，用標準酸溶液滴定計算揮發(fā)性鹽基氮含量。

第二法  自動凱氏定氮儀法
試劑和材料
除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的三級水。
試劑
氧化鎂(MgO)。
硼酸(H₃BO₃)。
鹽酸(HCl)或硫酸(H₂SO₄)。
甲基紅指示劑(C₁₅H₁₅N₃O₂)。
溴甲酚綠指示劑(C₂₁H₁₄Br₄O₅S)。
95%乙醇(C₂H₅OH)。
試劑配制
硼酸溶液(20g/L)。
鹽酸標準滴定溶液(0.1000mol/L)或硫酸標準滴定溶液(0.1000mol/L)。
甲基紅乙醇溶液(1g/L)。
溴甲酚綠乙醇溶液(1g/L)。
混合指示液: 1份甲基紅乙醇溶液與 5份溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合。

儀器和設備
天平: 感量為1mg。
攪拌機。
自動凱氏定氮儀。
蒸餾管: 500mL或750mL。
吸量管: 10.0mL。

分析步驟
儀器設定
標準溶液使用鹽酸標準滴定溶液(0.1000mol/L)或硫酸標準滴定溶液(0.1000mol/L)。
帶自動添加試劑、自動排廢功能的自動定氮儀，關閉自動排廢、自動加堿和自動加水功能，設定加堿、加水體積為0mL。
硼酸接收液加入設定為30mL。
蒸餾設定: 設定蒸餾時間180s或蒸餾體積200mL，以先到者為準。
滴定終點設定: 采用自動電位滴定方式判斷終點的定氮儀，設定滴定終點pH=4.65。采用顏色方式判斷終點的定氮儀，使用混合指示液，30mL的硼酸接收液滴加10滴混合指示液。
試樣處理
鮮(凍)肉去除皮、脂肪、骨、筋腱，取瘦肉 部分, 鮮(凍)海產(chǎn)品和水產(chǎn)品去除外殼、皮、頭部、內(nèi)臟、 骨刺，取可食部分，絞碎攪勻。制成品直接絞碎攪勻。肉糜、肉粉、肉松、魚粉、魚松、液體樣品等均勻樣品可直接使用。皮蛋(松花蛋)、咸蛋等腌制蛋去蛋殼、去蛋膜，按蛋∶水=2∶1的比例加入水，用攪拌機絞碎攪勻成勻漿。皮蛋、咸蛋樣品稱取蛋勻漿15g(計算含量時，蛋勻漿的質(zhì)量乘以2/3即為試樣質(zhì)量)，其他樣品稱取試樣10g，精確至0.001g，液體樣品吸取10.0mL，于蒸餾管內(nèi)，加入75mL水，振搖，使試樣在樣液中分散均勻，浸漬30min。
測定
按照儀器操作說明書的要求運行儀器，通過清洗、試運行，使儀器進入正常測試運行狀態(tài)，首先進行試劑空白測定，取得空白值。
在裝有已處理試樣的蒸餾管中加入1g氧化鎂，立刻連接到蒸餾器上，按照儀器設定的條件和儀器操作說明書的要求開始測定。
測定完畢及時清洗和疏通加液管路和蒸餾系統(tǒng)。

分析結果的表述
試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量按式(2)計算:

式中:
X ——試樣中揮發(fā)性鹽基氮的含量，單位為毫克每百克(mg/100g)或毫克每百毫升(mg/100mL)；
V₁——試液消耗鹽酸或硫酸標準滴定溶液的體積，單位為毫升(mL)；
V₂——試劑空白消耗鹽酸或硫酸標準滴定溶液的體積，單位為毫升(mL)；
c  ——鹽酸或硫酸標準滴定溶液的濃度，單位為摩爾每升(mol/L)；
14——滴定1.0mL鹽酸[c(HCl)=1.000mol/L]或硫酸[c(1/2 H₂SO₄)=1.000mol/L]標準滴定溶液相當?shù)牡馁|(zhì)量，單位為克每摩爾(g/mol)；
m ——試樣質(zhì)量，單位為克(g)或試樣體積，單位為(mL)；
100——計算結果換算為毫克每百克(mg/100g)或毫克每百毫升(mg/100mL)的換算系數(shù)。
實驗結果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的算術平均值表示，結果保留三位有效數(shù)字。
精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。

第三法  微量擴散法
原理
揮發(fā)性鹽基氮可在37°C堿性溶液中釋出，揮發(fā)后吸收于硼酸吸收液中，用標準酸溶液滴定，計算揮發(fā)性鹽基氮含量。


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